导读:
什么是类器官?为什么它这么火?
作为一名生物医学研究者,我第一次接触“类器官”这个词是在三年前。那时候,实验室刚引进了一套新的细胞培养设备,导师说我们要尝试用类器官模型来做药物筛选。
起初我对这个概念一知半解,只知道它和传统的二维细胞培养不同,但具体区别在哪,还真不太清楚。
后来通过查阅资料才知道,类器官是一种三维细胞培养系统,能够在结构和功能上模拟真实的人体器官。相比传统方法,它能更真实地还原人体生理环境,尤其在药物研发、疾病建模等领域展现出巨大潜力。
类器官实验protocol的核心步骤详解
做类器官实验的第一步是获取高质量的干细胞或组织样本。我们通常使用的是诱导多能干细胞(iPSCs)或者从患者身上提取的原代细胞。
接下来是关键步骤——培养体系的建立。这一步需要精确控制生长因子、基质胶、培养液的比例。记得有一次我因为加错了浓度,整整一周的努力都白费了。
经验分享:建议新手先从小规模培养做起,逐步扩大到高通量筛选所需的细胞量(约1.2-1.5x10⁷细胞/千化合物)。
复苏与扩增
类器官复苏后需要进行扩增,这是为了满足后续实验(如高通量筛选)的需求。我们一般会使用96孔板,每块板大约接种1万到5万个细胞。
扩增过程需要注意温度、CO₂浓度和换液频率。我们实验室曾因换液不及时导致一批类器官死亡,损失惨重。
传代与铺板
当类器官长到合适大小后,就需要进行传代处理。我们会将其剪碎或消化成单细胞悬液,重新接种到新的培养板中。
传代后的类器官需要静置培养48小时,之后才能加入化合物文库进行测试。
我做类器官实验的5个实用小技巧
- 保持操作一致性:每次操作尽量在同一时间段完成,避免因时间差异影响结果。
- 记录详细数据:建议用电子表格记录每一步的参数,便于后期分析和优化。
- 定期拍照留档:用显微镜定时拍摄类器官形态变化,有助于观察生长趋势。
- 注意污染防控:类器官培养对无菌要求极高,建议每次操作前后都进行紫外灭菌。
- 合理安排实验节奏:类器官实验周期较长,提前规划好每一步的时间节点非常关键。
未来趋势:类器官技术将如何改变科研世界?
近年来,类器官技术发展迅猛。同济大学尹晓磊团队提出的“以退为进”策略就是一个典型案例——他们通过增强类器官中干细胞的干性,提升了其分化潜能。
与此同时,类器官芯片技术也开始崭露头角。这种结合微流控技术的新方法,能够更精确地模拟器官之间的相互作用。
类器官不是终点,而是起点。未来的科研世界,或许真的会出现“人体替身”,让我们在实验室就能预测药物反应。
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